Jeseter je chován především pro svůj kaviár a vysoce kvalitní maso. Maso samců a samic je pevné a bílé a kaviár pochází pouze ze zralých samic. Typický produkční protokol v závislosti na druhu jesetera zahrnuje sběr samců na maso (ve věku 2–4 let) a sběr samic na kaviár (ve věku 5–9 let). Vzhledem k tomu, že strategie ve vztahu k samcům a samičkám je odlišná, je nutné přesně určit pohlaví ryb. Toho je velmi obtížné dosáhnout, protože jeseteři nemají vnější pohlavní rozdíly, zejména v mladém věku (3 roky od vylíhnutí). Na druhou stranu chromozomové manipulace, které se úspěšně aplikují na lososovité, nejsou u jeseterů účinné. Dnes existuje jen málo postupů pro určení pohlaví ryb. Můžete měřit koncentraci pohlavních hormonů (estrogen, progesteron, testosteron) nebo jiných metabolických ukazatelů, například prekurzoru tvorby žloutkového váčku – vitellogeninu v krvi nebo hlenu. Tato metoda však vyžaduje jednodenní práci v laboratoři a není vhodná pro terénní výzkum. Existují pouze dva způsoby, jak okamžitě určit pohlaví jesetera: přímé pozorování gonád (1) pomocí chirurgických postupů nebo (2) pomocí ultrazvukové diagnostiky. Nejpoužívanější metodou je ultrazvuková diagnostika dutiny břišní vhodným senzorem, který umožňuje rozlišit vaječníky a varlata. Tato metoda je spolehlivá, když jsou gonády dobře vyvinuté, hlavně u dospělých jedinců (36 měsíců). Postup není přesný v identifikaci pohlaví mladých jedinců (12-24 měsíců). Tento článek popisuje standardní techniku a nástroje pro chirurgické určení pohlaví jesetera.
Zahrnuje provedení malého řezu pro přístup do břišní dutiny a přímé pozorování gonád, zavedení nástroje (endoskop, laparoskop, boroskop atd.) nebo provedení biopsie. Gonády nebo bioptické vzorky lze prohlížet pouhým okem (makroskopicky) pomocí zvětšovacích čoček. Histologická analýza biopsie se provádí pod mikroskopem. Chirurgická biopsie je nejspolehlivějším způsobem, jak určit pohlaví mladých jedinců (16-36 měsíců) a stupeň zralosti gonád. Chirurgický postup zahrnující analýzu gonádové biopsie je „zlatým standardem“ nebo měřítkem pro testování přesnosti alternativních metod určení pohlaví. Lze jej provádět v terénu a při určité zručnosti bude úmrtnost minimální. Smrt po operaci zpravidla nastává v důsledku infekce, když je jeseter chován ve vodě s vysokou teplotou nebo špatnou kvalitou. Chirurgická intervence netrvá déle než 2 minuty na jednotlivce a nevyžaduje drahé chirurgické nástroje.
Zákrok má nevýhody spojené s jeho invazivitou, i když minimální. Mezi ně patří možnost infekce a relativně dlouhá doba trvání analýzy (několik minut). Kromě toho se používají chirurgické nitě, jejichž cena dosahuje 1 $ pro každého jednotlivce. Konečně, i přes relativní jednoduchost operace, je nutné rozvíjet dovednosti a schopnosti k jejímu provedení. Manipulace s rybami a školení nekvalifikovaného personálu by mělo být prováděno pod dohledem zkušeného ichtyologa nebo veterináře.
materiály
1. Zdroj čisté, okysličené (provzdušněné) vody;
2. anestetikum;
3. Nádoba na uchovávání ryb;
4. Zařízení pro manipulaci s rybami: nosítka, kozlíky, sítě s zvedákem;
5. Chirurgické nástroje: chirurgické rukavice, skalpel (č. 3), čepele (č. 10, 11, 15). Brown-Adson kleště na odběr tkáně (7×7 zubů) a Ellis tkáňové kleště (4×5 zubů). Těžké držáky jehel nebo nůžky (Olsen-Higuera) pro držení jehly při šití švu. Vstřebatelný steh: Vicryl (polyglactin 910) velikost 0 nebo 1 se šesti nebo čtyřmi reverzně řeznými chirurgickými jehlami; PDS II (polydioxanon) s 1 řezací jehlou CP-1.
6. Další vybavení: listy nebo poznámkový blok (nejlépe voděodolný); pero-tužka; skříňka na nářadí; malá nádoba pro skladování nástrojů ve sterilních podmínkách; ručník na ruce; stůl na nářadí; sterilní ubrousky, alkohol, jód pro dezinfekci nástrojů; kontejner na odpadky a použité materiály; zdroj jasného světla.
Protokol
Operační výkon je nízkotraumatický a spolehlivý při určení pohlaví jesetera. Zkušený zaměstnanec je schopen provést cca 300-500 operací denně. Úspěšnost některých prvků výkonu (typ anestezie a rozhodnutí o šití) je dána právním rámcem státu, mírou komfortu zaměstnance a možností infekce. Účelem toho je oddělit samce a vybrat samice s jasně viditelnými vaječníky. Pokud je obtížné určit pohlaví ryb, jsou často klasifikovány jako „neznámé“ a mohou být použity pro maso.
Odchyt a anestezie
Zpočátku se jeseter opatrně chytá pomocí sítí nebo sítě, aniž by ryby stresoval. Poté se podává anestezie, dokud se jedinec neobrátí hlavou dolů a nezpomalí pohyby žaberních krytů.
MS-222 (trikain methansulfonát) se používá jako anestetikum. Takto anestetizované ryby musí před použitím ke krmení projít 21denní očistou. MS-222 okyseluje prostředí v důsledku tvorby kyseliny methansulfonové, zejména v měkké vodě s nízkou alkalitou. Je třeba zkontrolovat pH vody, a pokud se zjistí, že pH je příliš nízké (<6.5), měl by se do anesteziologické lázně přidat pufr s hydrogenuhličitanem sodným. Mezi další narkotika patří 2-fenoxyethanol (300 mg/l) a benzokain (BZ-20 100-150 mg/l).
Alternativou k výše uvedeným anestetikům jsou deriváty hřebíčkového oleje Aqui-STM (75-150 mg/l) a Aqui-S20E (476-537 mg/l). Jesetery se úspěšně anestetizují ponořením do studené vody (10–12°C) se zavedením CO2 a čistého kyslíku. Po anestezii se ryba položí břichem nahoru. Zkušený personál obvykle drží ryby mimo vodu nejdéle 2-3 minuty, ale při delším pobytu na vzduchu je třeba žábry opláchnout čistou nechlorovanou vodou. Při vhodném tvaru sítě nebo kozy může být hlava jesetera ve vodě a oblast břicha ve vzduchu.
Dezinfekce
Operace by měla být prováděna za sterilních aseptických podmínek, kdykoli je to možné. Je třeba používat chirurgické rukavice a dezinfikovat nástroje. Základní dezinfekce zahrnuje proplachování zařízení saponátem a namáčení v roztoku 70% etanol, 65-90% isopropylalkohol, 1-3,5% roztok jódu (pozor: koncentrace jódu vyšší než 3,5% jsou toxické pro tkáně a nezajišťují další dezinfekci ). Jesetery vylučují hodně hlenu, který má antibakteriální aktivitu, takže jejich tělo nevyžaduje další léčbu. Povrch rány se nedoporučuje opracovávat, čistit nebo sušit, protože to poškozuje tkáň ryb. Pokud se uvolní příliš mnoho hlenu, měli byste povrch rány pečlivě osušit sterilní gázou s 1% roztokem jódu.
zářez
Nejlepší místo pro provedení řezu je pod játry na pravé straně ryby, kde se poměrně snadno obnaží pravá gonáda. Přístup k levé gonádě je obtížný, protože na ní spočívá slezina. Řez je veden 1-5 cm od ventrální střední čáry, naproti 3-5 ventrální ploštice anterior od břišní ploutve. Toto umístění poskytne přístup přímo nebo těsně nad gonádou. Přesné umístění řezu závisí na druhu a specifických vlastnostech každého jedince. Jeseteři vykazují úžasnou rozmanitost tělesné konstituce a vzorů hmyzu. Ve většině případů je gonáda jasně viditelná přes řez.
Řez se provádí skalpelem nebo nůžkami. Má délku 1-3 cm; délka závisí na použité metodě. Je nejmenší při endoskopickém vyšetření a největší při odběru biopsie. Upřednostňuje se jeden průchozí řez bez zvednutí skalpelu. Minimalizuje krvácení a poškození tkání. Ventrální strana těla podél střední linie jeseterů je špatně zásobena krví. Proto je lepší provést řez mírně mimo střed a vyhnout se dobře prokrveným svalům. Disekce tkáně a vyšetření gonád se provádí co nejrychleji, nejlépe před silným krvácením.
Výzkum
V některých případech jsou gonády velmi malé a pokryté tukem. Při manipulaci vám poslouží Ellisova tkáňová pinzeta (4×5 zubů), která se používá k přemístění gonád. Kromě toho se používají pro odběr vzorků biopsie. Při operaci je potřeba mít zdroj světla ve směru rány (baterku na hlavě). Někteří chovatelé nevidí gonády za denního světla, ale všimnou si jich, když je tělo ryby ve správné poloze vzhledem ke světlu.
Gonády jesetera jsou párové a skládají se z tukové tkáně (tukové tkáně) a „zárodečné tkáně“, kde se vyvíjejí spermie a vajíčka. Barva gonád se liší (bílá, žlutá, oranžová) v závislosti na podmínkách růstu a stravě. Hlavním problémem je rozlišení ovariální tkáně od tukové tkáně. Vaječníky samic jsou obvykle tmavší než varlata, která jsou zase bělavá nebo nažloutlá. Nicméně „definující charakteristikou“ jsou „smyčky produkující vejce“ – oblasti, ve kterých se vajíčka vyvíjejí. Tvar poutek připomíná složenou záclonu. Při pohledu shora připomínají klávesy klavíru. Ovariální tkáň má také zrnitou strukturu tvořenou vajíčky ve smyčkách. Mužské gonády obsahují tukovou tkáň, ale tkáň varlat je hladká, bělavá a oteklá; zralá varlata vypadají jako bílé, oteklé laloky. Občas najde chovatel ryb pohlavně dospělé samce. V tomto případě, pokud je tkáň varlete poškozena, je vidět bílá a krémově viskózní testikulární tekutina.
Vzhledem k tomu, že gonády jeseterovitých ryb jsou viditelné v břišní dutině, lze je rozlišit palpací. U samic lze nahmatat vaječné granule a kličky produkující vajíčka. Varlata jsou naopak hladká na dotek.
Pokud po prozkoumání a ohmatání nelze určit pohlaví ryby, je nutné odstranit malou oblast tkáně pomocí Ellis pinzety nebo jiného nástroje. Ze zárodečné tkáně gonád se odebere biopsie a uloží se do konzervačního prostředku (10% neutrální pufrovaný formalín nebo 70% roztok ethanolu) pro další histologické vyšetření. Bylo zjištěno, že tkáň odebraná samcům byla uložena v konzervačním prostředku. Testikulární tkáň je hustší než tkáň vaječníků, protože obsahuje cysty naplněné vyvíjejícími se spermiemi.
Steh
Po určení pohlaví může být vyžadována sutura. V některých případech, kdy se počet jedinců pohybuje v tisících, se steh neaplikuje. Pokud je délka rány menší než 2 cm, proces hojení probíhá velmi rychle a poranění není nebezpečné. Na druhou stranu pro intenzivní chov v RAS nebo rybniční kultuře se doporučuje použít steh, aby se zabránilo infekci ryb.
Tento postup vyžaduje zkušenosti a nástroje (skalpel s břity, Brown-Adsonovy kleště na tkáně a těžký držák jehly s vroubkovanými rty). Pinzeta Brown-Adson je ideální, protože má zuby, které uchopí, ale nezraní kluzkou kůži jesetera. Chirurgické držáky jehel s párem zoubkovaných rtů výrazně usnadňují držení jehly, která musí mít velký kalibr, aby pronikla kůží. Sada držáku jehly a nůžek usnadňuje proces šití. Vstřebatelný šicí materiál je pevný, pružný a je připevněn k jehle pro obrácené řezání, nejlépe pro jesetery (PDS II a Vicryl velikost 0 nebo 1, připevněné k jehlám CP-1 a OS-4/6). Chirurgická jehla s nití pro kontinuální steh na konci má průměr ekvivalentní průměru nitě. Tento typ nití je méně traumatický pro kůži ryb, která je tvrdá, není dostatečně elastická a často je doprovázena malými kožními chybami. Vstřebatelné stehy tenkého střeva fungují dobře pouze tehdy, pokud jsou ryby chovány ve studené vodě (pod 15 °C) až do úplného zhojení. V teplejší vodě se rozpouštějí až do úplného zahojení rány (úplné zahojení trvá 20–30 dní), tkáň se zanítí. Účinnost ostatních materiálů pro šití (lepidlo na látku, sponky) se na jeseterovi teprve testuje.
K aplikaci stehů a vázání uzlů používejte základní chirurgické techniky šití. Malé rány (1-3 cm) lze šít přerušovaně. U dlouhých ran (3-5 cm) se doporučuje horizontální steh, protože je pevný a má tendenci otáčet vnitřní okraje rány směrem ven, což urychluje hojení.
–
Frank A. Chapman a Joel P. Van Eenennaam. Akvakultura jeseterů — Specializované techniky: Určení pohlaví jesetera přímým vyšetřením gonád za použití minimálně invazivního chirurgického zákroku. edis.ifas.ufl.edu/fa183
