Jak vznikají chiméry?

S rozvojem inovativních technologií se lidé stále více dozvídají o světě kolem sebe a zejména o svém vlastním těle. Jedním z neobvyklých jevů v živé přírodě objevených relativně nedávno je chimerismus.

Chimérismus je jev, při kterém se organismus skládá z geneticky odlišných buněk; výsledkem mohou být samčí a samičí reprodukční orgány, dvě krevní skupiny nebo drobné změny ve fenotypu Živočišné chiméry vznikají splynutím několika oplozených vajíček. U zvířat může navíc při transplantaci orgánů dojít k chimérismu, v důsledku čehož se v jednom organismu objeví tkáň se dvěma různými genotypy. Například transplantace kostní dřeně může změnit vaši krevní skupinu. Chimérismus se obvykle neodhalí standardním vyšetřením, ale lze jej odhalit genetickým vyšetřením.

Termín „chimerismus“ byl poprvé použit v roce 1907 německým botanikem G. Winklerem pro rostlinné formy, které byly získány křížením pupalky a rajčete. V roce 1909 E. Baur při studiu pestrého pelargonia vysvětlil podstatu tohoto jevu pro rostliny. Ke studiu chimérismu přispěli i naši krajané. Popisem přírodních rostlinných chimér se zabývali M. S. Navashin a L. P. Breslavets.[4]

Živočišné chiméry jsou organismy, které se skládají z geneticky odlišných buněk odvozených ze dvou nebo více různých zygot. Chimérismus u zvířat je třeba odlišit od mozaiky, což je přítomnost geneticky heterogenních buněk pocházejících ze stejné zygoty v jednom organismu. Každá skupina buněk si zachovává své vlastní vlastnosti, což vede k tomu, že organismus je kombinací různých tkání.

Chimérismus u zvířat tedy může být buď výsledkem individuálního vývoje organismu (ontogeneze, vrozený chimérismus), nebo výsledkem transplantace orgánu nebo tkáně (například transfuze kostní dřeně nebo krve, umělý chimérismus).

Vrozený chimérismus Existují dvě formy: tetragametismus a mikrochimérismus. tetragametika – Je to forma vrozeného chimérismu vyplývající z oplodnění dvou samostatných vajíček dvěma spermiemi, po kterém následuje jejich spojení ve stadiu blastocysty nebo zygoty, aby se vyvinul do organismu se smíšenými buněčnými liniemi. Jinými slovy, chiméra vzniká splynutím dvou sourozeneckých dvojčat (i když k podobnému splynutí může zřejmě dojít i u jednovaječných dvojčat, ale vzhledem k tomu, že jejich DNA je téměř totožná, bude těžké tuto skutečnost experimentálně potvrdit).

Tetragametické chiméry mohou být samice nebo samci, nebo mají vlastnosti charakteristické pro hermafrodity. Během procesu ontogeneze se může stát, že buňky různých orgánů budou mít různou sadu chromozomů. Například játra chiméry se mohou skládat z buněk s jednou sadou chromozomů a ledviny se mohou skládat z buněk s jinou sadou chromozomů. Tento jev se vyskytuje u lidí a je zcela běžný. U bratrských dvojčat dochází k chimérismu v důsledku anastomóz krevních cév mezi plody různého pohlaví, v důsledku čehož se mezi nimi vyměňují pohlavní hormony a prekurzory zárodečných buněk. Navíc pravděpodobnost, že plod bude chiméra, se zvyšuje s mimotělním oplodněním. Mnoho chimér žije celý život bez vědomí svého stavu. Rozdíly ve fenotypu mohou být jemné (například rozdíl ve tvaru palce: mírně odlišné barvy očí, různá rychlost růstu ochlupení na různých částech těla atd.) nebo zcela neviditelné. Chimérismus může být také ukázán specifickým ultrafialovým světelným spektrem, ve kterém jsou na zádech viditelné výrazné skvrny připomínající šipku směřující dolů od ramen k dolní části zad; jde o projev nerovnoměrného rozložení pigmentu v buňkách dermis, tzv. Blaschkovy linie. U lidí je chimérismus určován přítomností dvou skupin červených krvinek v těle nebo, pokud byly sjednocené zygoty různého pohlaví, dvou pohlavních orgánů; taková osoba může mít různé oblasti kůže a vlasů (ve struktuře a barvě) nebo barvu očí (heterochromie). Je třeba poznamenat, že četnost tohoto jevu nenaznačuje skutečnou prevalenci chimérismu. Většina chimér nevykazuje fenotypové projevy, jak by se dalo očekávat, kdyby byly dvě různé skupiny buněk rovnoměrně rozmístěny po celém těle. Docela často se většina tkáňových buněk tvoří z jedné buněčné skupiny, například krev se skládá z buněk jedné skupiny a vnitřních orgánů z jiné.

Přirozené chiméry je téměř nemožné detekovat, dokud se neobjeví abnormality jako hermafroditismus nebo nerovnoměrná pigmentace. Nejpozoruhodnějšími případy přirozeného chimérismu jsou zbarvení želvoviny u koček nebo duální genitálie. Tetragameticismus má dopad na transplantaci kostní dřeně nebo orgánů. Typicky mají chiméry imunologickou toleranci k oběma buněčným liniím.

Existence chimérismu vytváří problémy v analýze DNA, což ovlivňuje aplikaci rodinného a trestního práva. Případ Lydie Fairchildové se například dostal před soud poté, co testy DNA prokázaly, že její děti s ní nemohou být biologicky příbuzné. Žena byla obviněna z podvodu a bylo zpochybněno i její právo na péči o děti. Obvinění proti ní byla stažena, když vyšlo najevo, že Lydia byla chiméra, a v tkáni jejího krku byla nalezena DNA odpovídající DNA dětí. Slavný je také příběh Karen Keeganové, která byla obviněna z toho, že není biologickou matkou svých dětí poté, co její dospělí synové podstoupili test DNA, který měl identifikovat vhodného dárce pro transplantaci ledviny ženy.

Mikrochimérismus– jev charakterizovaný přítomností malého počtu buněk v mnohobuněčném organismu placentárních savců, které pocházejí a jsou nezávisle přenášeny, mimo pohlavní rozmnožování, z jiného příbuzného mnohobuněčného organismu, a proto jsou geneticky odlišné od buněk hostitelského nosiče . Mnoho lidí se rodí s několika buňkami shodnými s buňkami jejich matky a počet těchto buněk u zdravých organismů během ontogeneze klesá. Lidé, u kterých zůstal počet buněk geneticky identických s buňkami jejich matky vysoký, měli více autoimunitních onemocnění, s největší pravděpodobností proto, že běžná imunitní vada brání imunitnímu systému zničit buňky s odlišnou DNA. Pokud krev pacienta obsahuje buňky od osoby opačného pohlaví, lze chimerismus snadno detekovat detekcí buněk s ženským a mužským karyotypem. V ostatních případech jsou krvinky pacienta typizovány podle HLA. Navíc u žen je to možné fetální mikrochimérismus – migrace buněk plodu do těla matky a také přechod buněk z předchozích těhotenství z krevního oběhu matky do těla plodu (migrace buněk od starších sourozenců k mladším prostřednictvím matky).

Vědci nemohou dospět k jednotnému názoru ohledně vlivu fetálního mikrochimerismu na zdraví matky: některé studie naznačují, že fetální buňky v těle matky aktivují imunitní systém a způsobují ústup autoimunitních onemocnění, zatímco výsledky jiných studií naznačují opak: fetální mikrochimerismus může způsobit další progresi autoimunitních onemocnění u matky.[9]

Stejně jako někteří jiní savci si lidé mohou vyměňovat buňky mezi dvojčaty během vývoje plodu. K migraci buněk dochází přes společnou placentu (placentární anastomózy). Heterozygotní dvojčata sdílejí své vlastní placenty, ale vyskytlo se několik případů, kdy heterozygotní dvojčata sdílela placentu. V této situaci dochází k výměně krve mezi dvojčaty, která nejsou geneticky identická, což má za následek chimérismus krvinek a možná i jiných tkání.[5] Předpokládá se, že frekvence tohoto jevu je podceňována a zvyšuje se s použitím technologií asistované reprodukce. Teoreticky je chimerismus nemožný u homozygotních dvojčat, protože jsou geneticky identická a pocházejí ze stejné zygoty. Vzácná pozorování ukazují, že k výměně buněk mezi takovými dvojčaty skutečně dochází. Je popsán případ monochoriálního diamniotického těhotenství, kdy se u jednoho z dvojčat vyvinula trisomie 21 v raném stádiu vývoje. Při narození mělo jedno z dvojčat fenotypové charakteristiky Downova syndromu, druhé mělo normální fenotyp. Mikrosatelitní analýza DNA ukázala, že dvojčata byla skutečně homozygotní. V epiteliálních buňkách dutiny ústní každého dvojčete přitom byly nalezeny pouze jeho vlastní buňky (disomické nebo trizomické na chromozomu 21), zatímco krev obsahovala buňky z obou dvojčat. Tento jev se nazývá chimérismus krevních buněk a vysvětluje se tím, že dvojčata s monochoriální placentou si během vývoje v 70 % případů vyměňují krev.

Přirozenou cestou symbiotický chimérismus vyskytuje se u čeratiidních ďasů a je důležitou součástí jejich životního cyklu. Jakmile samec dosáhne věku puberty, začne vyhledávat samici pomocí silných čichových receptorů. Po nalezení samice samec, který je menší než 2,5 centimetru, kousne její kůži a uvolní enzym, který požírá kůži jeho úst a jejího těla a spojuje pár na úrovni krevních cév. A i když je tato vazba nezbytná pro přežití samce, časem se vstřebá a spojí oba ďasy do jednoho hermafroditního organismu. Někdy se během tohoto podivného rituálu k samici připojí několik samců jako symbionti, všichni budou absorbováni do těla větší samice ďasa. Po páření se samicí dosáhnou samci pohlavní dospělosti vyvinutím velkých varlat, zatímco všechny ostatní orgány atrofují. Tento proces vytváří stálou přítomnost během tření, takže chimérské ryby mohou reprodukovat více potomků.[10]

Pro výzkum jsou chiméry uměle vytvářeny transplantací embryonálních buněk z jednoho organismu do embrya druhého a umožněním vývoje výsledné blastocysty. Stejně jako u klonování je proces vytváření a implantace chimér nepřesný a vývoj mnoha embryí se může nedobrovolně zastavit. Úspěšné experimenty vedou k velkým pokrokům v oblasti embryologie, protože vytvoření chiméry z buněk jedinců stejného druhu s různými fyzikálními vlastnostmi umožňuje vědcům sledovat diferenciaci embryonálních buněk během tvorby orgánových systémů v dospělém těle.

První známý chimérní primáti Existovala dvojčata opic rhesus, Roku a Hex, z nichž každá měla 6 genomů. Byly vytvořeny smícháním 4 totipotentních blastocystových buněk, které se spojily a „pracovaly“ společně na vytvoření orgánů. Bylo také zjištěno, že jeden z těchto primátů, Roku, byl sexuální chiméra; 4 procenta Rokuových krvinek obsahovala dva X chromozomy.[8]

Velký průlom v experimentech s chimérami nastal v roce 1984, kdy byla spojením ovčích a kozích embryí vytvořena ovčí-kozí chiméra a přežila až do dospělosti. Vytvoření této chiméry odhalilo několik potíží ve vývoji takového organismu. Když je kozí embryo implantováno do ovce za účelem březosti, imunitní systém ovce odmítne vyvíjející se embryo, ale embryo chiméry má imunitní markery obou druhů, což umožňuje embryu přežít implantaci do samice jednoho z rodičovských druhů.[1]

V srpnu 2003 oznámili vědci z Shanghai Second Medical University v Číně, že úspěšně spojili buňky lidské kůže a králičí vejce a vytvořili první lidská chimérní embrya. Embrya se vyvíjela několik dní v laboratorních podmínkách a poté byla zničena, aby se shromáždily výsledné kmenové buňky. V roce 2007 vytvořili vědci z University of Nevada School of Medicine v Renu ovci, jejíž krev obsahovala 15 % lidských buněk a 85 % ovcí.

Při studiu tohoto fenoménu hrají důležitou roli chimérské myši, které pomáhají zodpovědět mnoho otázek o tom, jaké procesy probíhají v živočišném organismu, který má dvě geneticky odlišné skupiny buněk. Chimérické myši mohou být vytvořeny buď injekcí nebo agregací embryonálních buněk různého původu.[3] První chimérní myš vytvořila Beatrice Mintz v roce 1960 agregací embryí v 8-buněčném stádiu. První injekce byla zase průkopníky Richarda Gardnera a Ralpha Brinstera, kteří vstříkli buňky do blastocysty a vytvořili chimérní myš, jejíž zárodečné buňky se vyvinuly výhradně z injikovaných embryonálních kmenových buněk (ESC). ESC jsou užitečným nástrojem při studiu chimér, protože je možné v nich vyvolat genové mutace pomocí homogenních rekombinací, které umožňují nahradit geny. Po tomto objevu v roce 1999 se stal primárním prostředkem k vytvoření celé generace specializovaných chimérických myší. Znalost raných fází vývoje myší umožnila vytvořit chiméry tohoto druhu. Embryo může být přeměněno na chiméru ve fázi štěpení (dvě až osm buněk), protože buněčná diferenciace v této fázi vývoje ještě nezačala. Embryo je možné pitvat v jiném stádiu a po izolaci skupiny buněk, ze kterých vznikla určitá buněčná linie, je transplantovat do jiného embrya.

Existuje mnoho různých kombinací, ze kterých lze úspěšně vyšlechtit chiméru a v souladu s účelem experimentu vybrat požadovanou kombinaci buněk a embrya; hlavními kombinacemi jsou kombinace ESC a diploidního embrya, diploidního embrya s diploidním embryem, ESC a tetraploidního embrya, diploidního a tetraploidního embrya, ESC a ESC. Kombinace embryonálních kmenových buněk a diploidních embryí je poměrně běžná metoda, protože genová náhrada může být provedena v ESC.

Etické a právní otázky tohoto problému. Jakýkoli nový směr v experimentální oblasti biologie a medicíny vyvolává etické a právní spory. Spojené státy a západní Evropa mají přísná právní a etická pravidla, která přísně zakazují určité experimenty s použitím lidských buněk, ale právní rámec se v jednotlivých státech liší. Vytvoření lidské chiméry vyvolává otázku: co nyní znamená pojem „člověk“? Tato otázka vyvolává vážné právní a etické problémy a vyvolává mnoho kontroverzí. Například šimpanzi nemají žádné právní postavení, a pokud zvíře představuje hrozbu pro člověka, je zabito. Pokud jsou šimpanzi geneticky upraveni tak, aby se více podobali lidem, mohlo by to smazat morální hranici mezi člověkem a zvířetem. Právní debata je dalším krokem v procesu rozhodování, zda by chimérám měla být poskytnuta zákonná práva. Kromě otázek souvisejících s právy chimér se lidé zajímají také o to, zda vytváření chimér s lidskými buňkami neporušuje lidskou důstojnost. Etické debaty zase generují odpovídající reakce v právní sféře. V květnu 2008 vedla živá debata v Dolní sněmovně Spojeného království o etice vytváření chimér pomocí lidských kmenových buněk k rozhodnutí, že chimérická embrya lze vytvářet v laboratoři za předpokladu, že budou zničena do 14 dnů. 11. července 2005 předložil senátor Sam Brownback Kongresu USA návrh zákona o zákazu lidských chimér, ale návrh zákona nebyl schválen. Návrh zákona byl vytvořen na základě výzkumu, že vědci ve svém výzkumu dospěli k bodu, že lidé a další živočišné druhy mohou být kombinovány za účelem vytvoření nové formy života. To by mohlo vyvolat vážné etické otázky, protože experimenty stírají hranici mezi lidmi a zvířaty a podle návrhu zákona by překročení této hranice bylo vůči lidstvu neuctivé. Poslední klauzule zákona o zákazu lidských chimér byla, že došlo k nárůstu zoonotických chorob a vytvoření chimér mezi lidmi a zvířaty by mohlo umožnit, aby tyto choroby postihly lidi. Po „smrti“ tohoto zákona v Kongresu ve Spojených státech nebyly podniknuty žádné další pokusy o vytvoření omezení ve výzkumu chimér.

V současnosti probíhá aktivní výzkum v různých oblastech medicíny a biotechnologie pomocí uměle vytvořených chimér. Již nyní se chiméry vytvořené z lidských buněk používají ke studiu různých nemocí. Vědci z University of Rochester v USA (stát New York) a University of Copenhagen v Dánsku tak pomocí chimérických myší s lidskými gangliovými buňkami našli důkaz, že jednou z možných příčin rozvoje schizofrenie je patologie mozku. buňky.[11] Výzkumné důkazy navíc naznačují, že uměle vytvořené chiméry mohou být použity k vytvoření transplantací jednotlivých orgánů, které jsou geneticky identické s příjemcem.[2] Můžeme tedy konstatovat, že chimerismus je aktivně studován a používán v medicíně.

Vyjadřuji svou vděčnost své vědecké školitelce, doktorce biologických věd, profesorce Galině Nikolajevně Solovykhové.

Anina N. Ovčí kozy: kříženci a chiméry. Chemie a život – XXI století – 2015 – č. 1 – str. 16-17

Naymak, Elena. Nové mýty o stvoření. Nový svět – 20009 – č. 2 – str. 138-151

Velká lékařská encyklopedie.

Krenke N.P. Rostlinné chiméry. – M-L.: Akademie věd SSSR, 1947. – 386 s.

Chen K., Chmait R. H., Vanderbilt D., Wu S., Randolph L. Chimerismus u monochoriálních dizygotických dvojčat: případová studie a přehled // Am J Med Genet A. – 2013. – T. 161A, no. 7. – S. 1817-24

Gengozian, N.; Batson, J. S.; Eide, P. (1964). “Hematologické a cytogenetické důkazy pro hematopoetický chimérismus u kosmana, Tamarinus Nigricollis.”

Friedman, Lauren. „Podivnější než fiktivní příběh ženy, která byla svým vlastním dvojčetem“

Masahito Tachibana, Michelle Sparman a Shoukhrat Mitalipov (leden 2012) „Generace chimérických opic Rhesus“

Yu N., Kruskall M.S., Yunis J.J., Knoll J.H., Uhl L., Alosco S., Ohashi M., Clavijo O., Husain Z., Yunis E.J., Yunis J.J., Yunis E.J. Sporné mateřství vedoucí k identifikaci tetragametického chimérismu // N Engl J Med. – 2002. – T. 346, vydání. 20. – s. 1545-52.

Chimera přikázala mladému muži Bellerophonovi zabít
Divoké, které plemeno bylo od bohů, ne od smrtelníků:
Lví hlava, dračí hřbet a kozí střed,
Strašně dýchala bouřlivým, požírajícím plamenem.
Zasáhl Hrozného, ​​povzbuzen zázraky bohů.

Genetická informace v DNA je zakódována v sekvenci bází a DNA různých lidí je z 99,9 % identická. Jedinečnost genetického kódu zajišťují oblasti strukturního polymorfismu, které se nazývají variabilní tandemové repetice. Používají se k identifikaci v metodách genetického testování. Tyto studie jsou založeny na principu, že každá buňka jedince obsahuje identický „instrukční manuál“ ve formě DNA.

Ale platí toto pravidlo vždy?

“Všichni lžou”, dokonce i DNA [1]

Bylo popsáno mnoho případů, kdy pokusná zvířata nebo lidé měli více než jednu genetickou složku. Takové organismy se nazývají chiméry – analogicky s mýtickým tvorem, jehož tělo se skládalo z částí mnoha zvířat a mají nejméně dvě různé populace buněk, které jsou geneticky odlišné a pocházejí z různých zygot [2].

Pro zvířata je chimerismus, stejně jako jeho fenotypové projevy, typičtější díky častým vícečetným březostem. Každá buněčná linie si zachovává svůj vlastní genotyp a v důsledku toho je organismus kombinací různých tkání.

tetragametická chiméra [3]

Umělý chimérismus

Umělý (umělý) chimérismus způsobují dárcovské krvetvorné buňky při alogenních transplantacích krevních složek nebo kostní dřeně. Po transplantaci bude mít příjemce tandemové repetice DNA – jeho vlastní i dárcova. Pokud má dárce stejný genetický vzor jako příjemce, ale je jiného pohlaví, vzorky od příjemce mohou být při identifikaci pohlaví chybně identifikovány. Vzorky jako krev, fragmenty bukálního epitelu a nehty mohou být infiltrovány dárcovskými buňkami; výjimkou jsou buňky vlasových folikulů [4].

Transplacentární chimérismus

V určitém období těhotenství dochází k pohybu fetoplacentárních buněk. Bianchi et al poprvé identifikovali fenomén cirkulace fetálních buněk v těle matky desítky let po těhotenství. Byly nalezeny ve štítné žláze, srdci, periferní krvi a lymfatických uzlinách [5]. Fetální variabilní tandemové repetice lze nalézt v mateřské plazmě již ve 42. dni těhotenství a množství fetální DNA se zvyšuje s gestačním věkem. Množství genetického materiálu však bude stále mnohem menší (ne více než 1 % všech tělesných buněk) než v případech alogenních transplantací, proto je tento proces charakterizován jako mikrochimerismus [6]. Dále bylo zjištěno, že proces může probíhat oběma směry – jak od plodu k matce (fetální mikrochimérismus), tak od matky k plodu (mateřský mikrochimérismus).

Může migrovat široká škála typů fetálních buněk, jako jsou trofoblasty, erytroblasty s jádry, krevní destičky, B a T lymfocyty, monocyty, přirozené zabíječské buňky a některé typy progenitorových/kmenových buněk. Ale pouze nediferencované buňky, takové mikrochimérické buňky s kmenovými charakteristikami, mohou cirkulovat po dlouhou dobu a nazývají se progenitorové buňky spojené s těhotenstvím. To znamená, že v budoucnu se tyto buňky mohou diferencovat v osteogenním, chondrogenním, myogenním a adipogenním směru, což je považováno za evoluční adaptaci k zajištění reparace v těle matky. Jejich patogenní účinek může být spojen se zahájením nebo exacerbací autoimunitních reakcí [7].

Je také možný „dvojitý“ chimérismus, kdy si heterozygotní embrya vyměňují buňky v důsledku anastomózy krevních cév placenty.

Tetragametický chimérismus

Tetragametický chimérismus je výsledkem oplodnění dvou vajíček dvěma spermiemi, po kterém následuje fúze dvou různých zygot v nejranějších stádiích vývoje. Tetragametická chiméra může mít dva genetické profily v krvi a různé DNA markery v různých částech těla, zatímco fenotypové známky přítomnosti různých typů buněk mohou, ale nemusí být přítomny. Studie Neng Yu a kolegů popsala případ, kdy se při hledání dárců ledvin pro 52letou ženu zjistilo, že nemohla být biologickou matkou dvou ze svých tří synů, kteří měli HLA svého manžela. haplotyp a unikátní soubor HLA determinantů místo jednoho z očekávaných mateřských haplotypů. Dále se ukázalo, že krvinky ženy byly zastoupeny pouze jednou buněčnou linií s charakteristickými markery a v ostatních orgánech a tkáních jsou buňky jak s HLA haplotypy 1 a 3, tak s haplotypy 2 a 4, které jsou potomky dvou různé fúzované zygoty, z nichž obě měly karyotyp XX (to znamená, že tato žena měla dvojče) [8]. Možná je i varianta hermafroditní tetragametické chiméry, která vzniká jako výsledek splynutí embryí různého pohlaví.

Fenotypové rozdíly mohou být buď jemné (například rozdíly ve tvaru palců, rozdílná rychlost růstu ochlupení v různých částech těla), nebo znatelnější: různé barvy očí (heterochromie), různá barva a struktura vlasů, nerovnoměrná pigmentace kůže , v případě hermafroditních organismů – přítomnost dvou pohlavních orgánů [7].

Kromě obtíží při provádění analýzy DNA ve forenzní praxi má chimérismus mnoho neprozkoumaných aspektů dopadu na zdraví takových organismů a vyhlídky na použití v medicíně, což je také v souladu s etickými a právními otázkami experimentů v této oblasti. .

Zdroje:

1. Zdroj obrázku: House M.D. Universal Media Studios
2. https://rear-view-mirror.com/2014/08/03/the-chimera/
3. zdroj obrázku: www.basepaws.com
4. Bianc. D.W. Současné poznatky o fetálních krvinkách v mateřském oběhu. J. Perinat. Med. 1998;16: 175-185.
5. George R., Donald P.M., Nagraj S.K., Idiculla J.J., Hj Ismail R. Vliv chimerismu v analýze forenzního určování pohlaví založené na DNA. Malays J Med Sci. 2013;20(1):76–80.
6. Kinsella F.A.M., Zuo J., Inman C.F., et al. Smíšený chimérismus vytvořený transplantací hematopoetických kmenových buněk je udržován hostitelskými a dárcovskými T regulačními buňkami. Blood Adv. 2019;3(5):734–743.
7. van Bever Y., Wolffenbuttel K.P., Brüggenwirth H.T., a kol. Multiparametrové vyšetření 46,XX/46,XY tetragametického chimérického fenotypického mužského pacienta s bilaterálními skrotálními vaječníky a ovulační aktivitou. Sex Dev. 2018;12(1-3):145–154.
8. Yu N. a kol. Sporné mateřství vedoucí k identifikaci tetragametického chimérismu. N Engl J Med. 2002. května 16;346(20):1545-52.